該實(shí)驗(yàn)廣泛用于學(xué)習(xí)記憶功能、認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)、神經(jīng)藥理學(xué)、認(rèn)知功能退行性變性等實(shí)驗(yàn)研究方面的研究,簡(jiǎn)單易操作,容易判別結(jié)果,可信度高,既可單獨(dú)作為檢測(cè)實(shí)驗(yàn)提供課題參數(shù),也可以作為其他學(xué)習(xí)記憶和認(rèn)知功能實(shí)驗(yàn)的輔助或預(yù)篩選實(shí)驗(yàn)。
二.實(shí)驗(yàn)裝置
廠家:上海欣軟信息科技有限公司
型號(hào):XR-XC105
材質(zhì):采用無(wú)味的ABS塑料材質(zhì),顏色為黑色(內(nèi)側(cè)壁)
組成:SuperAPAS穿梭實(shí)驗(yàn)視頻分析軟件、穿梭箱(大小鼠、底部可通電)、SuperShocker刺激控制器以及隔音箱、揚(yáng)聲器、視頻設(shè)備
三.實(shí)驗(yàn)方法
1. 在實(shí)驗(yàn)前1-2天,每天撫摸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1-5min,借以消除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)實(shí)驗(yàn)者的恐懼。
2. 訓(xùn)練期:先讓動(dòng)物在測(cè)試箱中自由活動(dòng)5min,以消除探究反射。將動(dòng)物置于穿梭實(shí)驗(yàn)箱電擊區(qū)。先給予條件刺激(燈光)和(或)蜂鳴音(純音刺激)20 s(時(shí)長(zhǎng)可調(diào)節(jié)),然后給以10s(時(shí)長(zhǎng)可調(diào)節(jié))的電刺激(電流強(qiáng)度為0.2-0.8mA,可調(diào)節(jié))。如果在亮燈或聲音響20 s內(nèi)大鼠逃向**區(qū)為主動(dòng)回避反應(yīng),電擊后才逃向**區(qū)為被動(dòng)回避反應(yīng)。經(jīng)過(guò)數(shù)次訓(xùn)練后,大鼠可逐漸形成主動(dòng)回避性條件反應(yīng),從而獲得記憶。共訓(xùn)練20~40次,即設(shè)定測(cè)試次數(shù)為20~40次。
3. 正式測(cè)試期:做實(shí)驗(yàn)時(shí),將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于穿梭箱電擊區(qū),方法步驟同訓(xùn)練期。記錄動(dòng)物遭受電擊的次數(shù)(被動(dòng)回避的次數(shù))以及動(dòng)物主動(dòng)回避的次數(shù);也可以記錄動(dòng)物主動(dòng)回避平均反應(yīng)時(shí)間,該值越小,說(shuō)明動(dòng)物主動(dòng)回避反應(yīng)越迅速。
四.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
主要應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù):
1.觀察時(shí)間,動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)箱中活動(dòng)的總時(shí)間,該值越小,說(shuō)明動(dòng)物發(fā)生主動(dòng)回避次數(shù)越多
2.主動(dòng)回避次數(shù),實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后動(dòng)物在燈光聲音發(fā)生過(guò)程中逃zhi**區(qū)的次數(shù)
3.被動(dòng)回避次數(shù),動(dòng)物受到電刺激發(fā)生躲避逃zhi**區(qū)的次數(shù)
4.主動(dòng)回避平均反應(yīng)時(shí)間,記錄每次從燈光或聲音開(kāi)始到發(fā)生主動(dòng)回避的時(shí)間,將其累計(jì)總和除以主動(dòng)回避次數(shù)得到該值
5.被動(dòng)回避平均反應(yīng)時(shí)間,記錄每次從電刺激開(kāi)始到發(fā)生被動(dòng)回避的時(shí)間,將其累計(jì)總和除以被動(dòng)回避次數(shù)得到該值
6.其余指標(biāo):無(wú)反應(yīng)次數(shù)、主動(dòng)回避潛伏期、被動(dòng)回避潛伏期
其中主動(dòng)/被動(dòng)回避次數(shù)指標(biāo)作為評(píng)價(jià)學(xué)習(xí)記憶能力的重要指標(biāo),主動(dòng)回避次數(shù)值越大,說(shuō)明動(dòng)物記憶能力越好,主動(dòng)回避平均反應(yīng)時(shí)間值越小,說(shuō)明動(dòng)物記憶越深刻,反應(yīng)越迅速
五.注意事項(xiàng)
1. 保持實(shí)驗(yàn)室安靜,光線不宜過(guò)強(qiáng),盡量避免給動(dòng)物額外刺激。2. 實(shí)驗(yàn)中應(yīng)及時(shí)**銅柵上的糞便等雜物,以免影響刺激鼠的電流強(qiáng)度。3. 動(dòng)物在24h內(nèi)有其活動(dòng)周期,故每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)選擇同一時(shí)間(上午8~12點(diǎn)或下午1~4點(diǎn)),前后2天的實(shí)驗(yàn)要在同一時(shí)間內(nèi)完成。
4. 電柵欄每次清洗后需要等完全干燥以后再次使用,以免引起電流刺激不均勻或者短路。
5. 如果老鼠長(zhǎng)時(shí)間逗留徘徊在實(shí)驗(yàn)箱中間過(guò)道門(mén)位置,在正常人為干擾下也不能離開(kāi),應(yīng)該考慮剔除該數(shù)據(jù)。
6. 在電刺激時(shí)候,有些動(dòng)物會(huì)選擇一些特殊的方式來(lái)躲避,比如瞬間多次跳躍或者支撐性站立起來(lái),這些偶然情況也會(huì)導(dǎo)致正常的主被動(dòng)回避次數(shù)出現(xiàn)較大誤差,也應(yīng)該考慮剔除。
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